Aglutinacija krvi je aglutinacija i sedimentacija crvenih krvnih zrnaca, bakterija i drugih ćelija koje nose antigene.
Proces se odvija pod uticajem aglutinina, koji su specifične supstance. Lektini ili antitela deluju kao ove supstance.
Moguće vrste aglutinacije pri određivanju krvne grupe
Aglutinacija je specifična i nespecifična. U prvom slučaju, reakcija se javlja uz učešće tri komponente:
- antigeni;
- antitijela;
- elektroliti (koristite izotonični rastvor).
Sve moguće vrste aglutinacije koriste se prilikom određivanja krvne grupe, ali to nije jedini slučaj.
U koju svrhu se koristi?
Test aglutinacije krvi se koristi za identifikaciju uzročnika zarazne bolesti. Istovremeno se taloži i lako ga je otkriti u sedimentu. Ovaj proces se koristi, kao što je gore spomenuto, u određivanju krvne grupe. Ovo je ono o čemu ćemo dalje razgovarati.
Koje su karakteristike?
Eritrociti sadrže antigene tipa A i B. Onivezuju se za antitela ά i β, respektivno. Krvne grupe i reakcije aglutinacije:
- 1, 0 (ά, β) - nema antigena na površini eritrocita;
- 2, A (β) – antigen A i antitijelo β prisutni;
- 3, B (ά) - sadrži antigen B i antitijelo ά;
- 4, AB (00) – dva antigena prisutna, bez antitela.
Vrijedi napomenuti da su antigeni već uočeni u embrionu. Što se tiče antitela, ona se pojavljuju nakon rođenja, u prvom mesecu života.
Kompatibilnost ljudi zavisi od krvne grupe. To je razlog odbacivanja fetusa od strane majčinog tijela. Drugim riječima, ona ima antitijela na krvne antigene nerođenog djeteta. U ovom slučaju dolazi do nekompatibilnosti. Osim toga, krvna grupa se mora uzeti u obzir prilikom transfuzije.
Priprema
Krvne grupe i reakcije aglutinacije su kompatibilni koncepti koji se često koriste u medicini.
Prije testiranja važno je slijediti određena uputstva. Potrebno je privremeno isključiti upotrebu određenih namirnica i lijekova. To će pomoći da rezultati budu precizniji. Preporuke koje treba poštovati propisuje lekar. Činjenica je da različite laboratorije možda nemaju iste opsege dobijenih vrijednosti, odnosno neznatno se razlikuju.
Uslovi testiranja
Da bi se krvna grupa tačno odredila, važno je odabrati pravu opremu. Ovo uključuje:
- fiziološki rastvor i pipeta;
- staklene šipke;
- standardni izohemaglutinirajući serumi;
- suhe zemljane ploče koje su podijeljene u 4 sektora.
Postoje zahtjevi za uslove testa:
- dnevno svjetlo;
- sobna temperatura iznad +16 ˚S;
- koristeći volumen krvi i seruma u omjeru 1:10;
- Pouzdani rezultati u roku od 5 minuta.
Gore su glavni uslovi i alati. Aglutinacija krvi se može izvesti na više načina, a svaki od njih postavlja individualne zahtjeve.
Metode
Moguće metode za određivanje krvne grupe pomoću aglutinacije:
- standardna metoda;
- unakrsna reakcija;
- upotreba tsoliklona;
- ekspresna metoda koristeći set "Erythrotest-Groupcard".
Standardna metoda
Aglutinacija krvi se manifestuje korišćenjem crvenih krvnih zrnaca pacijenta. Koriste se i standardni serumi koji sadrže poznate antigene.
Jedna kap od četiri seruma stavlja se na ravnu ploču. Zatim se pomoću staklenih štapića u nju unosi krv pacijenta za pregled. U ovom slučaju, zgodno je koristiti kapaljke. Omjer bi trebao biti 1:10. Serum i krv se lagano pomiješaju. Procjena se može izvršiti u roku od pet minuta.
Dešifriranje rezultata testa jednostavnom metodom
Nakon određenog vremenau kapima seruma se opaža prosvjetljenje. Kod nekih se može vidjeti da je došlo do aglutinacije eritrocita (male ljuspice), u drugima je nema.
Postoje sljedeće opcije:
- bez reakcije u svim uzorcima seruma − 1 grupa;
- zgrušavanje se dogodilo svuda osim za 2. uzorak - grupa 2;
- bez reakcije samo u 3. uzorku - 3. grupi;
- aglutinacija se dešavala posvuda – grupa 4.
Dakle, najvažnije je pravilno rasporediti serum. Tada neće biti teško dešifrirati rezultat. Ako je aglutinacija krvi slaba, preporučuje se ponovni test. U slučaju malih pahuljica, one se ispituju pod mikroskopom.
Unakrsna reakcija
Ponekad je nemoguće precizno odrediti krvnu grupu na jednostavan način. Aglutinacija se u ovom slučaju provodi metodom unakrsne reakcije. Za razliku od prve verzije testa, ovdje su važni standardni eritrociti. Krv pacijenta se sakuplja u epruvetu, centrifugira, a zatim se serum ispumpava pipetom radi daljeg istraživanja.
Stavlja se na tanjir u količini od 2 kapi, zatim mu se dodaju standardna crvena krvna zrnca grupa A i B. Sadržaj se miješa protresanjem posude.
Rezultati metode unakrsne reakcije
Nakon pet minuta, uzorci su spremni za pregled. Opcije su:
- došlo je do lijepljenja u oba kapi – 1 grupa;
- pahuljice nisuuočeno ni u jednom uzorku – grupa 4;
- proces je vidljiv u jednom uzorku - 2 ili 3 grupe (u zavisnosti od toga gde se tačno krv zgrušala).
Coliclon metoda
Za određivanje krvne grupe, aglutinacija na ovaj način se vrši korištenjem sintetičkih zamjena za serum. Zovu se tsoliklones. Sadrže umjetne zamjene za ά i β-aglutine poznate kao eritrotesti (ružičaste i plave, respektivno). Reakcija se odvija između njih i crvenih krvnih zrnaca pacijenta.
Ova metoda je najpreciznija i najpouzdanija. U osnovi, ne zahtijeva ponovno ispitivanje. Evaluacija rezultata se vrši na isti način kao iu slučaju standardne metode. Posebnost je u tome što se četvrta krvna grupa nužno mora potvrditi reakcijom sa specifičnom sintetičkom zamjenom (anti-AB). Osim toga, ne pokazuje lijepljenje kada se doda rastvor natrijum hlorida.
Ekspresna metoda sa setom "kartica Erythrotest-group"
S obzirom na moguće metode analize u određivanju krvne grupe, vrijedi napomenuti da ova metoda ima svoje karakteristike. Oni leže u činjenici da se rezultat može procijeniti ne samo u laboratoriji, već i na terenu. Za studiju se koristi poseban set. Sadrži karticu bunara sa osušenim reagensima koji su već prisutni na dnu. Pored anti-AB, anti-A i anti-B, anti-D se koristi za određivanje Rh faktora.
Ova metoda ne zahtijeva posebnu pripremu, dozvoljeno je koristiti krv iz prsta, prisustvo konzervansa u njoj je dozvoljeno. Prvo morate dodati kap vode u svaki bunar da se sastojci otopi. Nakon toga se dodaje krv, lagano promiješa. Za tri minute, rezultat će biti primljen.
Lažna aglutinacija
Ponekad podaci dobijeni nakon testa nisu tačni. Ovaj fenomen zavisi od određenih faktora.
Postoje tri tipa lažne reakcije:
- Pseudoaglutinacija. Pravo vezivanje ne nastaje, eritrociti se jednostavno savijaju u obliku novčića. Ako dodate par kapi fiziološkog rastvora, one se raspadaju. Sličan fenomen se prepoznaje pod mikroskopom.
- Hladna aglutinacija krvi. Takva reakcija se opaža ako su uvjeti za istraživanje bili nepovoljni. Kada je temperatura ispod +16˚C, može doći do spajanja.
- Panaaglutinacija. Ako postoji infekcija u krvi, rezultati testa mogu biti lažni. Ova pojava je moguća iu slučaju onkoloških bolesti, sa sepsom.
Aglutinacija je veoma važna u medicini. Omogućuje ne samo određivanje krvne grupe, već i identifikaciju uzročnika bolesti, kao i prisutnost infekcija. Glavna stvar je pridržavati se preporuka liječnika prilikom pripreme za ovaj postupak. Što se tiče medicinskog osoblja, njihov zadatak je stvaranje povoljnih uslova ipoštivanje svih pravila. Ovo je jedini način da se postignu tačni rezultati pri izvođenju aglutinacije krvi.
