Metoda preimplantacijske genetske dijagnoze koristi se za procjenu zdravstvenog stanja embriona dobijenog vantjelesnom oplodnjom prije implantacije u šupljinu materice. Metoda omogućava ne samo odabir zdrave buduće bebe, već i povećanje šanse za trudnoću. Tehnika se široko koristi u svim svjetskim klinikama koje se bave vantjelesnom oplodnjom.
Opći koncepti
Preimplantaciona genetska dijagnoza omogućava vam da izvršite sveobuhvatan pregled i isključite prisustvo hromozomskih abnormalnosti uopšte ili bilo koje specifično odstupanje. Nedavno, paralelno sa ranim defektima, provjeravaju se geni koji mogu izazvati pojavu tumora u odrasloj dobi (jajnici, crijeva, dojke).
U slučaju nosioca genomskih bolesti s majčine strane, biopsija više polarnih tijela jajne stanice se radi i prije oplodnje. Opisane metode su alternativa ranoj prenatalnoj dijagnostici, koja vam omogućava da upozorite na pobačaj ako fetus iznenada ima genetske patologije.
Preimplantaciona genetska dijagnoza vam omogućava da odredite pol buduće bebe već u procesu skrininga. Ovo se koristi za sprečavanje razvoja rodno povezanih anomalija.
Kako se genetske bolesti nasljeđuju
Razlikujte nasljedne patologije koje su nastale prema dominantnom, recesivnom i x-vezanom tipu.
| Vrsta nasljeđa | Karakteristike | Rizik od bolesne bebe |
| Dominantna | Jedan od partnera ima jedan defektan gen koji je dominantan u njihovom paru | 50% nasljeđuje gen |
| Recesivni | Oba partnera nose isti defektni gen, ali imaju normalan par | 50% postane nosilac, 25% dobije bolest |
| X-povezano | Žene su zaštićene od patologije svojim skupom hromozoma i isključivo su nosioci. Muškarce karakteriše razvoj anomalije | muškarac ima 50% šanse da naslijedi gen i bolest, žena ima šansu da postane nosilac kao njena majka - 50% |
Ko se provjerava?
Preimplantaciona genetska dijagnoza (PGD) se radi u sledećim slučajevima:
- Prisustvo jedne ili oba nasljedna oboljenja ili promjene u kariotipu. Često i sami partneriznaju za svoje probleme, rjeđe saznaju tokom procesa skrininga.
- Ponovljeni pobačaj. Problem u tome nisu anomalije od strane roditelja (možda uopće nisu), već genetske mutacije fetusa koje uzrokuju pobačaje.
- Starost osoba koje prolaze kroz IVF program je preko 38 godina.
- Historija više od 3 neuspješna pokušaja IVF-a.
- Muška neplodnost.
- Uključivanje ICSI (intracitoplazmatske injekcije sperme) u program oplodnje. Proces je ispunjen razvojem genetskih abnormalnosti u embrionu.
- Istorija hydatidiform madeža.
Karakteristike PGD
Istraživanja u oblasti preimplantacijske genetske dijagnoze sugeriraju da metoda ima pravo na postojanje, pomaže u dijagnosticiranju i prevenciji hromozomskih abnormalnosti, međutim, zahtijeva dalje poboljšanje.
Karakteristike PGD-a su sljedeće:
- Stopa pobačaja sa skriningom je niža nego bez skrininga;
- trenutno nema dokaza koji povećavaju šanse za trudnoću;
- postoji mogućnost lažnog rezultata: embrion je zdrav, ali rezultat pokazuje odstupanja, embrion je bolestan, ali studija kaže drugačije (5-10% slučajeva).
Preimplantaciona genetska dijagnoza (pregled blastomera)
Nakon dogovora za vantjelesnu oplodnju, reproduktivni specijalista procjenjuje potrebuPGD za bračni par. Ako je navedeno, partneri se mogu složiti ili odbiti proceduru. Zatim se potpisuje dokument kojim se potvrđuje dozvola za sprovođenje ankete.
Trećeg dana nakon oplodnje embriona, genetičar uzima jednu od formiranih ćelija blastomera na analizu. Vjeruje se da to nema posljedica po fetus, jer su sve ćelije zamjenjive.
Specijalac sprovodi istraživanja u jednoj od prethodno odabranih oblasti: proučavanje strukture ćelije pod posebnim fluorescentnim mikroskopom, DNK testiranje metodom lančane reakcije polimeraze da bi se utvrdilo prisustvo mutacije.
Na osnovu rezultata, embrioni sa abnormalnostima neće se koristiti u procesu implantacije. Odabrano zdravo i kvalitetno. Zatim se jedan ili više njih prenosi u matericu majke.
Kada se izvrši biopsija polarnog tijela, ispituje se majčin hromozomski set. Provodi se u slučaju da se otkrije prisutnost genetski određene patologije po ženskoj liniji. Postupak vam omogućava da utvrdite da li je jaje zdravo, koje će se koristiti za oplodnju, bez narušavanja njegove strukture. Ako se ne otkriju abnormalnosti, onda se može koristiti za oplodnju i transfer u materničnu šupljinu.
Postoje slučajevi kada se pregledaju polarna tijela, a zatim blastomeri. To vam omogućava da dobijete pouzdaniji rezultat. Šemu prema kojoj će se obaviti pregled odabire specijalistgenetičar.
Korišćene metode
Numeričke i strukturne abnormalnosti hromozoma određuju se metodom fluorescentne hibridizacije. Ova metoda vam omogućava da odredite sekvencu DNK ćelije. Koriste se posebne DNK sonde, koje su po svojoj strukturi komplementarne lokacije za DNK zone blastomera.
Sonda sadrži nukleotid i fluorofor (molekul sposoban za fluorescenciju). Nakon interakcije ciljne DNK sa DNK sondom, formiraju se osvijetljena područja koja se posmatraju pod fluorescentnim mikroskopom.
Koristite i PCR metodu (lančana reakcija polimeraze). Sastoji se od kopiranja dijela DNK pomoću enzima u određenim laboratorijskim uvjetima.
Dijagnoza aneuploidije
Ovo je jedna od metoda preimplantacijske genetske dijagnoze, koja omogućava otkrivanje prisustva numeričkih hromozomskih abnormalnosti (identifikacija dodatnih ili nedostajućih hromozoma).
Genetski materijal se sastoji od 46 hromozoma, od kojih polovinu daje otac, a drugu polovinu majka. Ako embrion dobije dodatni hromozom, to se zove trisomija, a gubitak bilo kojeg naziva se monosomija. Ovi nedostaci mogu rezultirati:
- nedostatak implantacije embrija;
- pobačaj;
- nasljedne patologije (Downov sindrom, Klinefelter, Shereshevsky-Turnerov sindrom).
Muška neplodnost i starost parasu česti faktori u razvoju ovakvih anomalija.
PGD monogenih patologija
Preimplantaciona genetska dijagnostika embriona radi utvrđivanja prisustva monogenih bolesti sprovodi se u porodicama u kojima je utvrđeno prisustvo naslednih anomalija. Ako par već ima bebu sa homogenom bolešću, onda se mogućnost da rodi još jedno bolesno dijete povećava nekoliko puta.
Uzrok je kršenje niza hromozoma u određenom dijelu DNK. Ove bolesti uključuju:
- cistična fibroza;
- adrenogenitalni sindrom;
- fenilketonurija;
- hemofilija;
- anemija srpastih ćelija;
- Wernig-Hoffmanov sindrom.
Prednosti i rizici metode
Pre-implantaciona genetska dijagnoza, koja se smatra dvosmislenom, ima određene prednosti u polju prenatalnog skrininga:
- samo kvalitetni i zdravi embrioni se prenose u matericu;
- smanjuje rizik od rađanja bebe sa genetskim abnormalnostima;
- prepoloviti rizik od pobačaja;
- prepoloviti rizik od višeplodne trudnoće;
- 10% veće šanse za implantaciju embrija;
- 20% povećanje šanse za uspješno rođenje bebe.
Rizik od nenamjernog oštećenja embriona tokom PGD-a je 1%. Verovatnoća pogrešnog rezultata je 1:10, osim toga, 3% šanse da će embrion sa bilo kojom anomalijom biti ocenjen kao zdrav.
Vjerovatnoća da će imati zdrav embrionodstupanja - 1:10. 1:5 šanse da će transfer embriona u šupljinu materice biti otkazan zbog pronađenih anomalija u svakoj od njih.
Kontraindikacije
Preimplantaciona genetska dijagnoza (PGD), čije posledice po embrion nisu jasno identifikovane, ima niz kontraindikacija za provođenje:
- fragmentacija embrija više od 30% (formiranje fragmenata do 25% se smatra normom);
- prisustvo multinukleiranih blastomera u embrionu;
- embrion ima manje od 6 blastomera trećeg dana svog razvoja.
Metod sigurnosti
Dijagnoza se sprovodi u ranoj fazi stvaranja budućeg organizma, kada su sve njegove ćelije pluripotentne, odnosno od svake se može formirati punopravan zdrav organizam.
Svi tekući PGD koraci ne uzrokuju vrijeme embrionu, fetusu i nerođenoj bebi. Nakon što se dobije uzorak za istraživanje, priprema se na poseban način. Ćelije se stavljaju na staklo, na koje se fiksiraju, ili u puferski rastvor.
Cijena procedure
Genetska dijagnoza prije implantacije, čija cijena varira od 50 do 120 hiljada rubalja, na prvi pogled izgleda kao skupa manipulacija. Međutim, zdravlje i liječenje djeteta sa genetski uslovljenim patologijama koštat će mnogo više.
Procedura daje sve prednosti u odnosu na žene koje su mogle začeti dijete prirodnim putemnačin, budući da im takva dijagnostička metoda nije dostupna. Preimplantaciona genetska dijagnoza, čija je cijena zanemarljiva u odnosu na samu vantjelesnu oplodnju, služi samo kao dodatak općem programu koji omogućava ne samo izdržati i roditi, već i odgojiti zdravu bebu.
