U članku razmotrite šta je to - PCR dijagnostika? Humani papiloma virus (HPV) danas je vrlo česta bolest koja se javlja u kroničnom obliku i prepuna je čestih recidiva. Lančana reakcija polimerazom (PCR) je najsavremenija metoda za dijagnosticiranje papiloma virusa. Ova metoda se smatra vrlo pouzdanom i pomaže u identifikaciji ne samo prisutnosti ovog virusa u ljudskom tijelu, već i njegove količine i raznolikosti. PCR analiza na HPV je osjetljiva i na neaktivne oblike virusa, kod kojih nema vanjskih manifestacija u vidu genitalnih bradavica i papiloma.
Na čemu se zasniva metoda?
Zasnovano na proučavanju pacijentove DNK u cilju otkrivanja prisustva stranih komponenti u ovom lancu. Sastoji se od četiri nukleotida, koji su raspoređeni u određenom nizu. Ako virus uđe u tijelo, dolazi do promjene redoslijeda u ovom lancu, što vam omogućava da pažljivo pratite aktivnost čak i najbeznačajnijih stranih čestica. HPV PCR tehnika istraživanja se provodi korištenjem virusnih čestica, koje određuju brzinu diobe stanica.
Šta definiše istraživanje?
Ovaj dijagnostički princip vam omogućava da pratite aktivnost HPV-a ne samo dok je u pasivnom stanju, već i tokom perioda inkubacije. PCR dijagnostika utvrđuje:
- prisustvo HPV-a u tijelu;
- sojevi koji inficiraju pacijenta;
- kvantitativni sadržaj u tijelu.
Papiloma virus inficirao je većinu ljudi, ali jaka imunološka odbrana potiskuje njegove manifestacije i ne dozvoljava da se umnože. Dakle, otkrivanje HPV-a na kvalitativni način ne može uvijek biti opravdano, jer nije racionalno ako su virusne čestice prisutne u tijelu, ali je njihov utjecaj toliko minimalan da ni na koji način ne šteti čovjeku. Kvalitativna analiza pokazuje pozitivan rezultat, a to čovjeka često zbuni.
Kvantitativna metoda
Zato se za dijagnozu najčešće koristi kvantitativna metoda koja vam omogućava da pratite broj virusnih agenasa u tijelu i utvrdite koliko je njihova aktivnost opasna. Osim toga, važno je utvrditi raznolikost HPV sojeva. Dijele se prema stepenu onkogenosti: neke mogu postati glavni faktor u nastanku onkoloških bolesti, dok su druge apsolutno bezbedne i mogu izazvati samo neke kozmetičke probleme.
Svaka pojedinačna situacija zahtijeva individualni pristup,stoga, pre podvrgavanja ovom laboratorijskom testu, preporučljivo je konsultovati se sa kvalifikovanim specijalistom koji će vam reći kako i za koje sojeve bi bilo najbolje testirati, uzimajući u obzir stanje pacijenta i kliničke simptome.
Indikacije za provođenje
Najznačajniji razlog za podvrgavanje PCR testu na HPV je prisustvo bradavica na tijelu.
Zaraza ovim virusom moguća je samo od osobe. Nakon prodiranja u krvotok, patogeni mikroorganizam počinje se razmnožavati u gornjim slojevima kože, što dovodi do razvoja karakterističnih manifestacija - stvaranja kondiloma ili papiloma. Budući da je ova bolest prilično česta i javlja se kod gotovo 80% populacije, vjerovatnoća oboljevanja je izuzetno velika. Papiloma virusi se prenose putem:
- nezaštićeni snošaj;
- dok se ljube;
- pri rođenju djeteta od mame;
- na kućni način;
- sa bliskim kontaktom sa kožom.
Glavne indikacije za analizu krvi i PCR bris na HPV su kožni simptomi ove bolesti, koji izgledaju kao viseće bradavice na tankoj stabljici nalik na niti. Čak i ako se takvi kondilomi ne uoče na koži, virus može i dalje biti prisutan u krvi, ali će njegov tok biti asimptomatski. Ukoliko je pacijentu dijagnosticirana infekcija papiloma virusom 18. i 16. podtipa, preporučuje se da se redovno kontroliše kod specijalista poput ginekologa i urologa, podvrgava se dijagnostičkim procedurama i testira na HPV, jerSamo pravovremenom dijagnozom moguće je spriječiti razvoj određenih karcinoma.
Vrste tehnika
U sklopu PCR dijagnostike za HPV, razvijene su četiri glavne metode testiranja, od kojih svaka ima neke specifičnosti i propisuje se uzimajući u obzir stanje bolesne osobe. Za odabir najbolje metode potreban je savjet stručnjaka. Dakle, četiri metode:
- Kvalitativna metoda koja se koristi za pobijanje ili potvrdu prisutnosti virusa u tijelu. Njegov glavni nedostatak je nemogućnost utvrđivanja tipa HPV soja (samo 14-21 tip). Najčešće se kvalitativna metoda koristi istovremeno s drugim metodama za otkrivanje papiloma virusa. Rezultat se prijavljuje koristeći dvije ocjene: "nije pronađeno" ili "otkriveno". Odnosno, ova tehnika ili navodi prisustvo strane DNK, ili ukazuje na njeno odsustvo.
- Genotipizacija je metoda koja može utvrditi prisustvo virusa u ljudskom tijelu i utvrditi njegovu raznolikost. Ova metoda se koristi u slučajevima kada je potrebno utvrditi ostaje li DNK virusa nakon tretmana ili se uočava recidiv kao posljedica nove infekcije. Genotipizacija pomaže da se proceni efikasnost terapije određivanjem tipa HPV-a. Ako je to isti soj od kojeg je pacijent liječen, onda je liječenje bilo neuspješno. Ako analiza pokaže prisustvo drugog tipa HPV-a, to može ukazivatiponovna infekcija.
- Kombinirana metoda, koja je visoko specijalizirana dijagnostička metoda zasnovana na kombinaciji kvalitativne detekcije 16 sojeva korištenjem genotipizacije. Rezultat se može predstaviti sa 3 odgovora: „otkriven soj 16“, „nije otkriven“i „otkriven je uključujući HPV tip 16“. Ova metoda se koristi kada sumnjate na prisustvo vrste papiloma virusa koji može uzrokovati rak grlića materice kod žena.
- Kvantitativna PCR metoda za HPV visokog onkogenog rizika, koja vam omogućava da odredite nivo virusa u krvi i pratite njegov razvoj. Smatra se najinformativnijim, jer vam omogućava da odredite težinu patološkog procesa, na osnovu čega se odabire ispravan tretman. Tehnika se zasniva na određivanju broja virusnih ćelija unutar proučavanih 100 hiljada. Ako je njihov ukupan broj veći od 5, to ukazuje na visoku koncentraciju papiloma virusa u tijelu, što povećava vjerojatnost nastanka stanica raka. Ako je iznos manji od 3, koncentracija se smatra zanemarljivom.
Kako se pripremiti i položiti test?
Krv se može uzeti kao biomaterijal za HPV, ali se najčešće uzimaju sekreti iz uretre kod muškaraca i cerviksa kod žena.
Nije potrebna posebna priprema za PCR za HPV. Glavni uslov je da ne mokrite nekoliko sati prije zahvata. Osim toga, preporučljivo je ne imati seksualne odnose 2-3 dana prije studije, a neuzimati alkoholna pića. Istovremeno, ne zaboravite na intimne higijenske procedure.
Za muškarce
Muškarci uzimaju bris - glava penisa i uretra se tretiraju fiziološkom otopinom. Specijalista koristi specijalnu četkicu koja se ubacuje u mokraćnu cijev za oko 4 cm. Biološki materijal se sakuplja laganom rotacijom, stavlja u epruvetu i šalje u laboratoriju na istraživanje. Istovremeno, možete ga čuvati najviše 2 dana od trenutka preuzimanja.
žene
Razmaz za PCR analizu na HPV kod žena radi se na sledeći način: sterilni rastvor se nanosi na cerviks, zatim se četkom uzima bris iz cervikalnog kanala. Aparat se ubacuje na dubinu od približno 1 cm, nakon čega doktor rotacijskim pokretima struže zidove kanala. Biološki materijal se stavlja u specijalnu epruvetu, gde stoji oko 15 sekundi. U njemu ga stručnjak briše o zidove, a zatim ga vadi. Zatim se sadržaj epruvete šalje na laboratorijsko ispitivanje.
Pravilno uzimanje uzoraka materijala za istraživanje je ključ uspješne dijagnoze i dobivanja pouzdanog rezultata. Ako se istovremeno naruši sterilnost, a strani mikroorganizmi prodru u epruvetu, tokom analize može se prepoznati virus, kojeg zapravo nema u tijelu pacijenta. Do greške može doći i zbog male količine materijala uzetog za istraživanje.
Gdje uzeti PCR za HPV, mnoge ljude zanima. Testovi se mogu uraditi u bilo kojoj medicinskoj ustanoviklinici ili laboratoriji, na primjer, u "Invitro" ili "Hemotest".
Prednosti metode
PCR je jedna od glavnih dijagnostičkih metoda i trenutno ostaje najpopularnija među ljekarima. Ova studija se provodi ne samo za otkrivanje HPV-a, već vam omogućava i otkrivanje drugih patoloških mikroorganizama koji se mogu prenijeti seksualnim kontaktom. Takva analiza pomaže u dijagnosticiranju skrivenih infekcija, hepatitisa itd. PCR test na HPV ima niz prednosti u odnosu na druge metode za otkrivanje bolesti. Ove pogodnosti su:
- Visoka specifičnost. Analiza pomaže da se odvoje tragovi stranog DNK sa velikom vjerovatnoćom prilikom proučavanja prikupljenog biomaterijala.
- Visoke performanse. PCR studija je automatizirani proces koji pomaže da se studija provede direktno na dan analize. Ova brzina omogućava osobi da ne brine o rezultatima dugo vremena i da ga dobije u svojim rukama za nekoliko dana.
- Visoka osjetljivost. Testiranjem je moguće istražiti aktivnost virusa čak i tokom perioda inkubacije, kada su njihove koncentracije vrlo niske. Ovo pomaže da se spriječi nastanak patološkog procesa i započne pravovremena terapija.
- Mogućnost izvođenja nekoliko analiza odjednom. Na osnovu jednog uzetog uzorka krvi može se provesti dijagnostika za određivanje više bolesti odjednom. Na primjer, možete istovremenoza identifikaciju uzročnika gonoreje i klamidije. Istovremeno, ovaj postupak neće moći negativno utjecati na pouzdanost rezultata.
Mane studije
Uprkos velikoj popularnosti i informativnosti ove analize, postoje neki negativni aspekti PCR dijagnostike za HPV. Glavni među njima je vjerovatnoća lažno pozitivnih rezultata. To se dešava kada je terapija već sprovedena, infekcija je uništena, ali mrtve ćelije virusa i dalje ostaju u tkivima organizma. Obnavljanje ćelija traje neko vreme. Ako provedete studiju prije 2-3 mjeseca nakon tretmana, PCR može pokazati pozitivan rezultat. Tehnika ne uočava nikakve razlike, jer je usmjerena na potragu za virusnom DNK, koja se može pronaći čak iu već mrtvim stanicama. To doprinosi lažno pozitivnim rezultatima. Ova situacija se može izbjeći ako se laboratorijski test obavi u roku koji odredi ljekar koji prisustvuje.
Transkript
Šta će pokazati PCR dešifriranje za HPV?
Doktor treba da protumači rezultate testa. Ali takođe je važno da pacijent bude svjestan strukture lista s rezultatima. Ako analiza pokazuje da "DNK nije otkriven", onda u krvi nema papiloma virusa. Ako je indikator Lg 5 ili više, to ukazuje na njegovu visoku koncentraciju u krvi, Lg 3-5 - značajnu količinu, manje od 3 - beznačajnu količinu.
Lažno negativna analiza
Takođe,može doći do lažno negativne analize. To se događa ako:
- prikupljeni biološki materijal je nepropisno uskladišten ili transportovan;
- sterilni uslovi su narušeni, a drugi mikroorganizmi su ušli u primljenu krv pacijenta;
- zbog neprikladnosti reagensa.
Da biste eliminisali mogućnost lažno negativnih rezultata, potrebno je odabrati odobrenu laboratoriju sa visoko kvalifikovanim osobljem za ovu analizu.
Detaljno smo ispitali kako i zašto se sprovodi PCR dijagnostika. Šta je to sada je jasno.
